製品紹介
世界の医薬品市場において、抗体医薬品は連続して売上ランキングの上位を占め、市場競争もますます激化しています。抗体生産コストの削減は市場競争力を高めるための重要な要素です。抗体生産のボトルネックを解決するには、まず第一歩としてProtein A親和性クロマトグラフィーの改良が必要です。UniMab® 50 Protein A 親和性クロマトグラフィーメディアは抗体製造企業のために開発されました、優れた機械的強度、低反発、優れた化学安定性、耐アルカリ性、および高流速下での高い動的結合容量の製品です。
UniMab® 50 は、独自の特許技術を使用して製造した高性能、耐アルカリ性の再結合型Protein A親和性クロマトグラフィーメディアです。このメディアは、単分散多孔性ポリメタクリル酸メチル（PMMA）微粒子を基材とし、専有の表面修飾技術とエポキシカップリングによりProtein Aを結合させて製造され、単クローン抗体やFcフラグメントが含まれる組み換えタンパク質類のバイオ大分子の分離精製に適しています。UniMab® 50は、優れた機械的強度、低反発力、優れた化学安定性、耐アルカリ性を持ち、高流速下でも高い動的結合容量を維持できるため、実験室から工業生産に至る幅広いニーズに対応します。これにより、企業の生産コストを低減し、競合製品に対して次のような独自の優位性を持ちます。
１）耐アルカリ性があり、0.1～0.5 M NaOHでの洗浄に耐え、寿命が長く、生産コストが低い
２）単分散で均一な粒径を持つ高強度の親水性基材を使用し、より高い操作圧力と線性流速に対応可能。
３）耐アルカリ性のProtein Aは独自の固定結合技術で使用し、基材の脱落が少なく、耐アルカリ性が強化されている。
４）高流速下で40 mg/mLヒトIgGの高い動的結合容量を持ち、全行程でより高い結合容量と、より低い非特異的吸着を実現し、同種の製品に比べて優れた性能を示しています。
５）最大流速が約800 cm/h、最大耐圧力が約0.8 MPaで、同種製品よりも高性能を発揮。
６）異なる抗体の洗浄脱落の条件が均一で、抗体精製プロセスの理想的な選択肢です。
表1. UniMab®50親和媒体仕様
| 項目 | 詳細 |
| 製品名 | UniMab® 50 |
| 分離原理 | Protein A 親和捕獲 |
| 基質 | ポリメタクリル酸メチル (PMMA) |
| 粒径 | 50 μm |
| 配基結合方式 | エポキシ結合 |
| 動態結合容量 | ~40 mg·mL⁻¹ (人IgG, 5分間の滞留時間) |
| 最大耐圧 | 0.8 MPa |
| CIP (定置洗浄) | 0.1-0.5 M NaOH |
| 推奨流速 | 100-800 cm/h |
| pH安定性 | 2～12 |
| 化学安定性 | すべての一般的な緩衝液、10 mM 塩酸、0.1M ホスホ酸 (pH 3)、6M 尿素、6M グアニジン塩酸塩、30% イソプロパノール、20% エタノール |
| 使用温度 | 2-40℃ |
| 保存 | 20%エタノールまたはメタノール中、2-8℃ |
溶剤互換性試験
25℃の条件で、充填剤を異なる濃度および種類の試薬中に24時間浸漬し、浸漬前後で充填剤がIgGに対する静的結合能力（≧95%以上が適合とする）の比較を行い、充填剤と溶剤の互換性を評価します。関連する試薬の種類と濃度の結果は以下の表に示されています。
表2.関連溶解試薬の種類と濃度の結果
| 名称 | 濃度 |
| 甲醇 | 2% |
| 酢酸ナトリウム | 1 M |
| 塩化ナトリウム | 4 M |
| エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム | 100 mM |
| 酢酸 | 1 M |
| エタノール | 100% |
| アセトン | 2.50% |
| 塩酸グアニジン | 6 M |
| グリシン | 1 M |
| 尿素 | 6 M |
| イソプロパノール | 30% |
| クエン酸ナトリウム | 1 M |
| ポリエチレングリコール | 5% |
| ポリエチレングリコール （分子量 1500） | 1% |
| 塩化ナトリウム | 0.1 M |
| Tween 80 | 1% |
| Tween 20 | 1% |
| ショ糖 | 1 M |
| n-プロパノール | 5% |
| Triton X-100 | 1% |
UniMab® 50 安定性試験
化学安定性試験
50℃環境温度で、UniMab® 50充填剤を異なるpH値（pH1〜14）の溶液中に浸漬し、24時間保管後、浸漬液中のTOC値を測定することで、化学安定性を評価しました。結果は以下の通りです。
表3. pH 安定性試験結果
| 異なる pH 値の浸漬液 | TOC (PPM) |
| pH1:100mM HCl | 197.2 |
| pH2:10mM HCl | 96.5 |
| pH3:1mM HCl | 41.7 |
| pH4:0.1mM HCl | 37.6 |
| pH7:超純水 | 36.3 |
| pH10:20mM ホウ酸(NaOH調整) | 96.3 |
| pH11:20mM ホウ酸(NaOH調整) | 125.5 |
| pH12:10mM NaOH | 154.8 |
| pH13:1M NaOH | 979.5 |
| pH14:mM NaOH | 3069 |
温度安定性試験
UniMab® 50 充填剤を40℃の恒温箱に置き、それぞれ20％エタノールおよび2％ベンジルアルコール溶液に浸漬して4週間保存し、毎週、填充材のIgGの動的結合容量を測定し、その結果から充填剤の安定性を評価します。次の表には、3回分の充填剤が2種類異なる浸漬液で保存された際の動的結合容量の変化が示されています。（動的結合容量の単位：mg/mL Gel（5分間の保持時間））。
表4. 温度安定性試験
| 測定周期 | IgG 動的結合容量 （20％エタノール浸漬保存） | ||
| NO.1 | NO.2 | NO.3 | |
| 初始条件 | 39.8 | 39.6 | 39.4 |
| 第1週 | 40.1 | 39.6 | 39.6 |
| 第2週 | 39.9 | 39.2 | 39.4 |
| 第3週 | 39.5 | 39.6 | 39.4 |
| 第4週 | 39.6 | 39 | 39.2 |
溶剤残留測定
適切な溶剤を使用して、UniMab® 50 充填剤の製造過程で残留する溶剤を抽出・濃縮し、その残留量を測定した結果は以下の表に示されています。
表 5. 溶剤残留測表
| 溶剤 | 制御要求 |
| DMF | ≤5 ppm |
| エタノール | NA |
細胞培養液中のモノクローナル抗体（mAb）捕捉応用
次は、 UniMab® 50 親和性クロマトグラフィーメディアが細胞培養液中でモノクローナル抗体を捕捉する性能に関する実験結果です。実験は、UniMab® が卓越したモノクローナル抗体の親和性と捕捉能力を持つことを示しています。
| 設備 | AKTA purifier |
| カラム | NmTRAP 1mL |
| サンプル | モノクローナル抗体細胞培養液上澄み、5 mL |
| 流速 | 0.2 ml/min |
| 平衡液 | PBS |
| 洗浄液 | 20 mM NaAC, pH 5.5 |
| 洗脱液 | 20 mM NaAC, pH 3.5 |
| 再生 | 0.1M NaOH |
| 滞留時間 | 5分 |
図2. UniMab® 50による細胞培養液中の
モノクローナル抗体の純化分離性能。
表6. UniMab® 50による モノクローナル抗体（mAb）の回収率
| 駐留時間（分） | サンプル 体積（ml） | サンプル量（ml） | 洗脱 （CVs） | 回収率（%） |
| 0.5 | 5 | 33.5 | 23.2 | 69.3 |
| 2 | 5 | 33.5 | 26.8 | 79.9 |
| 4 | 5 | 33.5 | 31.8 | 94.9 |
UniMab® 50親和性クロマトグラフィー媒体製品仕様書
| 製品型番 | 包装 | 品番 |
| UniMab® 50 | 30 mL | 17010-050100-2030 |
| 50 mL | 17010-050100-2050 | |
| 100 mL | 17010-050100-2100 | |
| 300 mL | 17010-050100-2300 | |
| 500 mL | 17010-050100-2500 | |
| 1 L | 17010-050100-1001 | |
| 5 L | 17010-050100-1005 | |
| 10 L | 17010-050100-1010 | |
| 50 L | 17010-050100-1050 | |
| 100 L | 17010-050100-1100 |
注: 7.7 mm × 22 mm、16 mm × 25 mm、7.7 mm × 100 mmのカラムプリパックをご提供可能です。その他の規格やカスタマイズのご要望がある場合は、お問い合わせください。
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