製品紹介
NW DexG-25シリーズのデキストランゲルは、生体分子の分離と精製に使用されるクロマトグラフィー媒体です。このゲルはデキストランを原料としており、架橋剤によって生成されたデキストラン微粒子で、親水性、多孔性の特性を持っています。主にウイルス、タンパク質、多糖、核酸などの生物サンプルのバッファー交換、脱塩、小分子物質の除去に使用されるほか、ペプチド、オリゴヌクレオチドの分離精製や、抗生物質、化学合成薬、天然物の分離精製にも使用されます。また、化学工業におけるナノ材料の精製や、環境保護分野の汚水処理にも利用されています。
NW DexG-25の分離・精製の原理は分子ふるい（分子篩）原理、もしくはゲル濾過原理に基づいており、これは最も簡単で穏やかなクロマトグラフィー技術です。この分子篩原理は主に次の2つの分野で使用されます。
- 成分分離：
分子の大きさの違いによって、試料を大分子群と小分子群に分け、分離を行います。例えば、タンパク質分子と塩分子、大型ウイルス粒子と小分子汚染物質を分離することができます。主にウイルス分離、脱塩、バッファー交換に使用されます。 - 高分解能分離：
生体分子の大きさの違いに基づいて分離を行います。高分解能分離では、サンプルを一つまたは複数の成分に分離できます。例えば、凝集体から単量体を分離したり、単量体分子から凝集体を除去したり、分子量や分子量分布の解析を行います。注意点として、天然のタンパク質には空間構造があるため、場合によってはタンパク質の分子量と天然構造のサイズが一致しないことがあります。つまり、一部の大きな分子の天然構造を持つタンパク質は、凝集体に比べて分子量が小さな線形分子よりも小さい挙動を示すことがあります。
非ゲルろ過分離（吸着）では、芳香族の小分子（プリン、ピリジンなど）が低イオン濃度下でイオン吸着を起こす場合があります。 もう一方の用途としては、特定の条件下で緩衝液条件を調整することにより、非ゲルろ過クロマトグラフィーを用いて変性タンパク質の再フォールディングを行うことができます。 NW Dex G-25の最も一般的な用途は、脱塩や緩衝液交換です。
NW Dex G-25は、ゲルの粒子サイズに応じて以下の4種類に分類されます。
NW Dex G-25C（粗粒子）
NW Dex G-25M（中粒子）
NW Dex G-25F（細粒子）
NW Dex G-25 SF（超細粒子）
NW Dex G-25シリーズのデキストランクロマトグラフィー媒体の技術仕様
| 製品名 | NW Dex G-25 C | NW Dex G-25 M | NW Dex G-25 F | NW Dex G-25 SF |
| 分離原理 | 分子篩 | |||
| 基質 | デキストラン微粒子 | |||
| 平均粒径(水溶膨潤) | 320 µm | 140 µm | 80 µm | 50 µm |
| 分離範囲(線性分子) | 1×10³〜1×10⁴D | |||
| 分離範囲(球状分子) | 1×10³〜5×10³D | |||
| 最大流速 | 1400 cm/h | 640 cm/h | 360 cm/h | 80 cm/h |
| 耐圧 | 0.5 MPa | |||
| pH安定性 | 2〜13 | |||
| 化学安定性 | 水溶性溶液、1M NaOH、6M 塩酸グアニジン、30% イソプロパノール、 70% エタノール | |||
| 使用温度 | 4〜40°C | |||
| 保管条件 | 20% エタノール、4〜30°C | |||
NW Dex G-25 デキストランアガロースは親水性微粒子であり、惰性材料で、通常は生体分子と反応しません。ゲルろ過は温和な分離・精製技術であり、温度、塩濃度、pH値などは分離効果に影響を与えません。クロマトグラフィーの過程で、サンプルは元の緩衝液から流動相へ徐々に移行します。サンプルの溶解緩衝液と流動相緩衝液は、できるだけ同じ成分を使用することが推奨されます。異なる成分を使用する場合は、サンプルの溶解度に注意する必要があります。
クロマトグラフィーの応用
異なる用途における応用：
成分分離：サンプルロード量は通常カラムベッド体積の10～30%です。試験に基づいて塩濃度に応じたサンプルロード量を確認します。
流速の影響：成分分離においては、流速の影響は小さく、適切な圧力条件下で比較的高い流速を使用することが可能です。
図１. 緩衝液の置換または有害物質の除去
高分解能分離：
a)NW Dex G-25シリーズのデキストランゲルクロマトグラフィー媒体は、通常1K〜5KDのペプチドの分離に使用されます。
b)一般的に、カラム長は60cm以上のものを使用します。
c)サンプルの注入量は1〜5%です。
d)流速は分解能に大きな影響を与えるため、通常は低い流速を使用します。
e) 150mM NaClを添加すると、非特異的吸着の減少に有利です。
Nw Dex G-25試薬の安定性と耐性
| 試薬 | 耐性 | 試薬 | 耐性 |
| 2-クロロエタノール 309% | OK | 蟻酸 104% | OK |
| 2-メルカプトエタノール 0.1M | OK | グリシン-HCl 0.1M pH 1.0 | OK |
| 酢酸 50% | 平衡および洗浄に使用可能 | グアニジン塩酸塩 6M | OK |
| アセトン 609% | OK（媒体が収縮します） | ヒドラジン 809% | OK |
| アルカリ溶液 | OK | 塩酸 0.1M | OK |
| アンモニア水 | OK | メタノール 75% | OK |
| 塩溶液 | OK | 酸化剤 | 使用を避けてください |
| CHAPS 30mM | OK | ピペリジン 1M | OK |
| クロロホルム/メタノール 3:1 | OK | プロピオン酸 1M | OK |
| デキストラナーゼ | 使用を避けてください | ピリジン 1M | OK |
| ジメチルスルホキシド | OK | ホウ化ナトリウム 4mg/ml | OK |
| ジオキサン 509% | OK | デオキシコール酸ナトリウム 16mg/l | OK |
| ジチオスレイトール 1mM | OK | ドデシル硫酸ナトリウム 39% | OK |
| エタノール 95% | OK | 尿素 8M | OK |
| フォルミン酸バッファー 0.1M | OK |
NW Dex G-25ゲル濾過クロマトグラフィー媒体製品仕様書
| 品名 | 包装 | 品番 |
| NWW DexG-25C | 100 mL | 60011-003401-2100 |
| 500 mL | 60011-003401-2500 | |
| 1L | 60011-003401-1001 | |
| 10L | 60011-003401-1010 | |
| NW Dex G-25 M | 100 mL | 60011-003301-2100 |
| 500 mL | 60011-003301-2500 | |
| 1L | 60011-003301-1001 | |
| 10L | 60011-003301-1010 | |
| NW DexG-25F | 100 mL | 60011-003201-2100 |
| 500 mL | 60011-003201-2500 | |
| 1L | 60011-003201-1001 | |
| 10L | 60011-003201-1010 | |
| NW DexG-25SF | 100 mL | 60011-003101-2100 |
| 500 mL | 60011-003101-2500 | |
| 1L | 60011-003101-1001 | |
| 10L | 60011-003101-1010 |
注: 7.7 mm x 22 mm、16 mm x 25 mm、7.7 mm x 100 mmのクロマトグラフィー事前充填カラムを提供できます。その他の仕様やカスタムのご要望については、お問い合わせください。
