NanoGel dT20 mRNA 親和性クロマトグラフィー媒体

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製品紹介

 NanoGel® dT20 親和性充填剤は、特にmRNAの分離精製を目的として設計された単分散の超大孔性ポリマー樹脂です。この充填剤は、PS-DVB(ポリスチレン-ジビニルベンゼン)硬質基材を使用しており、平均粒径は約50µmです。基材表面にはlinker結合によりdT20が配置され、mRNA3’末端にあるポリアデニル酸(polyA)と高い親和性を持ち、mRNAの捕捉を大きく簡略化します。この充填剤は、結合容量が高く、高塩、高pH、高温に耐性を持ち、使用が簡単で可燃性や有毒な試薬を一切使用する必要がありません。通常のmRNA分離精製条件下で効率的に捕捉と解離が可能であり、高流速での使用も可能です。そのため、工程開発の時間を短縮し、効率を向上させることができます。また、mRNAとプロセス中で発生した他の成分(例えば逆転写DNAなど)との分離にも有効です。

図1. NanoGel™ dT20 構造図

表1. NanoGel™ dT20 技術仕様

項目内容
製品名 NanoGel™ dT20
基質 ポリスチレン-ジビニルベンゼン(PS/DVB)
粒径 50 µm
配基 dT-20 メル
動的結合容量 ~2 mg/mL(mRNA)
最大耐圧 3 MPa
CIP 定置洗浄 0.1 M NaOH
推奨流速 50-300 cm/h
pH安定性 2~12
化学安定性 一般的な緩衝液、1M 塩酸、2M 酢酸、100% エタノール、イソプロパノールなどの一般的な有機溶剤に対応。強酸化剤、ベンゼン、テトラヒドロフランとの接触を避けてください。
使用温度 2-65°C
保存 20% エタノール、2-8°C
製品の応用

 NanoGel™ dT20 親和性クロマトグラフィー充填剤の開発は、ワクチンや遺伝子治療の応用において使用されるさまざまなmRNA構築体の産業チェーンの下流の大規模な精製のニーズに応えるために行われました。この充填剤は、高い選択性と親和性、優れた結合容量を持っています。塩溶液によるサンプルの吸着と水による洗脱という単純な精製ステップで、ポリアデニル化(poly A)尾部が選択的にmRNAを捕捉します。図1に示されているのは、NanoGel™ dT20を使用して1,000塩基対のmRNAを捕獲し、純化した際の親和性クロマトグラフィーの図です。poly A尾部を持つmRNAサンプルは、0.5M NaClの条件でNanoGel™ dT20と塩基対を結合します。緩衝液に塩が含まれていない場合、dT20配基の主鎖上のリン酸基の負電荷とpoly A主鎖上のリン酸基の負電荷が反発し、これによりmRNAが容易に洗脱されます。

図 2. NanoGel™ dT20 を使用してmRNA(1000 nt)を捕捉・精製した際のクロマトグラフィー図。
常温下で水による洗脱を行い、回収率は70%以上。

動的結合容量試験データ

 室温条件下で、0.1M NaOHを使用して定置洗浄(CIP)を行い、各サイクルでCIPアルカリ接触時間は30分で、NanoGel™ dT20(L11W281A)の結合容量を測定します。100サイクル目の洗浄後にNanoGel™ dT20の動的結合容量が15.6%低下しました。

図3. NanoGel™ dT20(L11W281A)の
耐アルカリ性DBC(動的結合容量)データ。CIP: 0.1M NaOH

表2. NanoGel dT20親和性クロマトグラフィー媒体製品仕様書

製品型式包装品番
NanoGel dT2010 mL17030-050150-2010
NanoGel dT2030 mL17030-050150-2030
NanoGel dT2050 mL17030-050150-2050
NanoGel dT20100 mL17030-050150-2100
NanoGel dT20300 mL17030-050150-2300
NanoGel dT20500 mL17030-050150-2500
NanoGel dT201 L17030-050150-1001

プレパックドカラム仕様書

カラム型式仕様品番
NmTRAP 1mL7.7 × 22 mm77221-17030-050150
NmTRAP 5mL16 × 25 mm16255-17030-050150
NmSCREEN 4.7mL7.7 × 100 mm77105-17030-050150
NmVALID 8/1008 × 100 mm08101-17030-050150
NmVALID 8/2008 × 200 mm08201-17030-050150
NmLOAD 16/10016 × 100 mm16101-17030-050150
NmLOAD 16/20016 × 200 mm16201-17030-050150
NmLOAD 26/10026 × 100 mm26101-17030-050150
NmLOAD 26/20026 × 200 mm26201-17030-050150
NmLOAD 50/10050 × 100 mm50101-17030-050150
NmLOAD 50/20050 × 200 mm50201-17030-050150

注: カスタム要求については、お問い合わせください。

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